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Séquençage du génome de levure par nanopore (ONT)

Séquençage du génome de levure par nanopore (ONT)
 
 
Obtenez des génomes de levure complets avec des annotations de haute qualité — rapide et fiable.
Idéal pour l'assemblage de novo à partir de populations clonales de levures en utilisant la technologie à longues lectures d’Oxford Nanopore.

Ce que vous pouvez accomplir

  • Générer des assemblages de génome de haute qualité, annotés
  • Obtenir des métriques d’assemblage détaillées et des outils de visualisation
  • Séquencer des chromosomes entiers sans artefacts induits par PCR
  • Séquençage sans hypothèse préalable de génomes natifs complets de levure

 

Avant de commencer

Pour bien préparer votre projet, merci de préciser :

  • Enverrez-vous de l’ADN génomique purifié ou des pellets de cellules de levure ?
  • Préférez-vous un assemblage standard ou hybride (avec polissage par lectures courtes) ?
  • Si vous envoyez de l’ADN : avez-vous vérifié la concentration et la pureté de l’ADN génomique de haut poids moléculaire (HMW) ?

Workflow

Un pipeline modulaire et optimisé pour le séquençage complet du génome de levure :

Analyse bioinformatique

Votre génome est assemblé et annoté :

  • Assemblage de novo poli du génome
  • Prédiction et annotation des gènes
  • Évaluation de l’exhaustivité avec BUSCO
  • Métriques de qualité pour les lectures brutes et les contigs
  • Rapport interactif au format HTML

Vous recevez :

  • Lectures brutes (.fastq.gz)
  • Génome poli (.fasta)
  • Annotations génétiques (.gff et .gbk)
  • Rapport de synthèse (.html)
  • Métriques des contigs, scores BUSCO et statistiques visuelles (.png/.tsv/.txt)

Si vous fournissez un génome de référence, vous recevrez également une analyse de variants et de couverture.

Délai d'exécution

  • 10 jours ouvrables si ADN génomique déjà extrait
  • 15 jours ouvrables si extraction à partir de cellules de levure

Exigences pour les échantillons

Option 1 : ADN génomique déjà extrait

Type Taille du génome Conc. min. Volume min.
ADN génomique < 20 Mb 50 ng/μl 20 μl

Critères de qualité ADN :

  • ADN double brin, HMW (>50 % >15 kb)
  • ≥1 μg d’ADN total (≥1,5 μg si polissage Illumina demandé)
  • Pureté : 260/280 > 1,8 ; 260/230 entre 2,0–2,2
  • Tampon recommandé : 10 mM Tris-HCl (pH 8) avec 1–2 mM EDTA

Merci de confirmer la qualité de l’ADN avant l’envoi.

Option 2 : Pellets de cellules de levure (pour extraction ADN)

  • À resuspendre uniquement dans le tampon NAP (pas de RNAlater ni autres conservateurs)
  • Souches BSL-1 et BSL-2 accessibles à la lysozyme acceptées
  • Envoyez des pellets de cultures en phase exponentielle ou début stationnaire
  • Assurez-vous d’avoir assez de biomasse pour éviter un échec d’extraction

Remarque : nous ne cultivons pas les cellules — l’ADN est extrait directement à partir de votre matériel.

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